FISH图文报告系统

乳腺癌 (Her2) 什么情况下要做FISH，有什么作用？

 

当病患被检查出乳腺浸润性导管癌，临床上, 会通过穿刺进行免疫组化检查后，如发现HER2(2+)，为了进一步提升精准与明确的治疗方案，医生会依照指引做进一步的FISH检查。

 

免疫组化 (IHC) 虽然是目前临床上常用的检测乳腺癌组织中蛋白表达的方法，它的检查结果里有很多项，但对乳腺癌而言，最重要的是前3个：ER、PR、HER2。

这3个指标直接决定了乳腺癌的分子分型：激素阳性、HER2阳性、还是三阴性。

 

免疫组化简便、费用低廉、可重复性好，但缺点就是检测结果会存在一定的主观性，准确率较低。

 

特别是对于HER2(2+)的检查结果存在一定偏差（10%-20%的假阳性，5%-10%的假阴性）。因此对这部分患者，如果想要用靶向治疗的话，就需要加做一个FISH检测，好明确患者HER2是否阳性。

 

FISH技术检测基因表达具有高稳定性、高准确性和高灵敏性以及重复性好的特点，是目前公认的检测基因表达的金标准。

 

临床上，所有的乳腺癌患者，都会先进行免疫组化，检测Her2蛋白表达情况。当结果显示Her-2蛋白表达HER2(2+)时，一般来说都需要再进行FISH检测，确定Her2基因是否存在扩增，能否用靶向治疗。

 

 

 

FISH的检测原理

 

荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization），简称FISH。基本原理：应用荧光染料标记探针DNA，变性成单链后与变性后的染色体或细胞核靶DNA按照碱基互补的原则进行杂交，形成可被检测的杂交双链核酸，在荧光显微镜下观察并记录结果。

 

由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列，因而探针可以直接与染色体进行杂交从而将特定的基因在染色体上定位。与传统的放射性标记原位杂交相比，荧光原位杂交具有快速、检测信号强、杂交特异性高和实现多重染色等特点。

 

FISH是传统的活检，依赖于患者原发组织，在临床中可以检测CNV、Fusion等

例如，HER2检测可以对乳腺癌患者能否用靶向药物赫赛汀进行建议，FISH是HER2检测的金标准

 

特色

• 每一套 手动FISH 会配置一台mCounter 手动计数FISH荧光讯号光点
• 高清五百万像素的相机, 多色多图层的FISH 取像, 图像修饰, 标记批注, 产生报告.
• 精准的定量分析每一个FISH 讯号, 每一个细胞, 包括荧光讯号的强度与型态.
• 自动计数及统计分类 (HER2, ALK, PTEN, melanoma 等.)
• 可同时在不同样本, 细胞, 血液, 羊水, 骨髓. 做自动计数及统计分类
• 精准的染色体端粒分析
• 循环肿瘤细胞的侦测与定量分析
• 自动反复归位功能, 可以满足不同染色程序的工作. 让 FISH 工作流水线顺畅.
• 可搭载建构互联网, 更可汇整 HiSKY 的光谱图像分析, 执行光谱 FISH 分析.

 

mCounter 是 HiFISH的选配FISH 荧光信号计数分类键盘. 它是一款经济实惠的无线计数分类键盘，是一提高效率的实用计算工具, 可无缝集成到 HiFISH 软件平台。

 

FISH 技术人员可根据 FISH 荧光信号模式对细胞进行计数和分类。 技术人员无须反复离开目视显微镜, 同时进行目视与计数. 也无需使用笔纸记录. mCounter 的结果会自动记录在 病例数据管理器 (CDM) 管理系统，并集成到报告和实验室信息管理系统 (LIS) 。 收集到的统计数据以图形和表格格式供用户使用。

 

除了键盘输入外，mCounter 还提供声音提示，确保准确、可靠和全面的计数，使用人员可专注在显微镜下的信号。 通过可靠、准确、全面的细胞计数和分类, 双盲多位技术人员评分, 可以落实更好的质量保证验证.

 

mCounter 可支持任何显微镜、细胞类型和信号模式

 

 

专业CDM数据管理

ASI 研发数据管理系统CDM ( Case Data Manager ) 具有人工智能的庞大数据管理， 此 CDM 可以整合所有ASI 的应用软件。

 

中文化的报告输出

CDM可执行中文化的报告输出及无纸化的云端分析管理。其设计强健的数据库功能，可以对所有病例及样本，做有效率的交叉应用管理，此也说明全世界各大医检单位, 建构数十到数百套联网系统的原因所在。

 

 

 

 

FISH 基本配置 :

FISH 成像工作站 (不包括显微镜)

高性能 5百万像素 CMOS 黑白相机

FISH 分析软件

 

附加应用软件 :

荧光杂染(FISH)分析应用软件模块

荧光点计数分析软件模块

 

选配 :

脱机版分析工作站

互联网工作站

荧光显微镜 搭配Nikon、Leica、Zeiss、Evident（Olympus）、舜宇等

荧光滤镜转盘

荧光滤镜 

荧光探针，如进口雅培、安捷伦、国产安必平、龙进等

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【FISH临床价值】

 

一、FISH应用于Her-2基因检测

酪氨酸激酶-人类表皮生长因子受体2（Her-2）在20%-30%乳腺癌患者中有基因的扩增和蛋白的过度表达。临床研究表明，Her-2阳性的乳腺癌浸润性强、无病生存期短、预后差，针对这部分病人，使用曲妥珠单抗（赫赛汀）治疗有效。目前通常使用的免疫组织化学方法无法区分Her-2中度阳性的患者是否存在Her-2基因的扩增，直接检测Her-2基因扩增水平的荧光原位杂交技术被认为检测乳腺癌Her-2基因扩增的的「金标准」。

 

使用FISH的优点在于用传统的分子生物学方法抽取肿瘤组织的DNA或RNA作南方或北方点墨法的时候，很难避免受到邻近肿瘤组织的间质组织之干扰，会稀释肿瘤组织所特有的DNA表现，而FISH可以避免这个问题。FISH在荧光显微镜下可以确认出肿瘤所在的位置，以PathVysion test来说，它会把HER-2基因部位呈现橘色荧光亮点，它也会将第17对染色体的中心粒(centromere)呈现绿色亮点，我们只要比对橘色及绿色亮点的数目，若橘点/绿点大于2，就表示有HER2基因过度表现（因正常细胞之橘点数目比绿点数目比值小于2）。

 

 

二、FISH应用于ALK基因断裂检测

间变性淋巴瘤激酶（ALK）属于胰岛素受体超家族，能与多种基因发生融合，在人类的多种恶性肿瘤中发现，如非小细胞肺癌，ALK重排导致ALK基因的异常激活，进而通过激活下游信号通路导致细胞增殖和生成，促进肿瘤生长。ALK融合基因首次发现于2007年，研究表明ALK融合基因突变可诱导肺癌的发生，给予ALK酪氨酸激酶抑制剂肿瘤可迅速消退，现已有相关药物批准上市用于治疗ALK阳性的NSCLC患者。

 

三、FISH在产前诊断中的应用

FISH具有与金标准几乎相同的灵敏性和特异性，无需参考传统的细胞遗传学检测结果，单独检测结果同样可信。

 

 

【FISH 检测注意事项】

1.羊水标本要注意：在羊水穿刺时，是否有母血的污染。

2.石蜡切片标本要注意：胃蛋白酶消化时间，时间不宜过短，防止细胞间质消化不彻底。

3.肺部穿刺标本要注意：由于穿刺液通常较少，操作要更加谨慎。

4.注意变性温度和杂交温度，并且加探针及以后操作环节要避光，加探针后要密封好。

5.在荧光显微镜下阅片时，要注意杂点信号的干扰，严格按标准计数。

总之，荧光原位杂交技术在临床上具有重要的应用价值，在疾病诊断及病情判断方面显示了极大的优势。

 

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